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货号：C3501-0020，C3501-0100,
规格：20ml/瓶、100ml/瓶
英文名称：Tissue Digestive Mix-I
【预期用途】
用于从组织上消化原代干细胞，做后续细胞体外增值培养。培养后的细胞仅用于体外分析检测，不作为治疗使用。
【检验原理】
以特定酶自组织块分离出原代间充质干细胞是常见的细胞培养技术。组织消化液利用数种重组表达的消化酶制备而成，无动物源成分。组织消化液针对组织的细胞外基质而设计, 不含胰酶，不会伤害细胞。可以有效地消化细胞外基质，进而从组织块 (脐带、脂肪、胎盘) 分离出大量的原代间充质干细胞，作为后续细胞增殖使用。
【主要组成成分】
由 DMEM -LG 基础培养基、膠原脢、分散脢、脱氧核糖核酸酶组成。
【适用范围】
收获组织 (脐带、脂肪、胎盘)的原代间充质干细胞, 做后续细胞体外增殖培养。
【储存条件及有效期】
应贮存在-10~-20℃，有效期为1年。开封后存放4℃，注意避光，1周内使用。不建议反复冻融。
【生产日期与失效日期】
详见产品标签。
【使用方法】
以脐带组织为例
1. 将脐带用DPBS 漂洗干净，剪成1-50px大小，剔除血管。
2. 将组织块剪成3-5mm3，移入50ml离心管，再加入适量的分离液。
* 一条长度10公分的脐带建议加入10ml的分
离液；或者组织块 : 分离液（vol）= 1:1。
** 视情况而定，可自行在分离液中添加1%青
链双抗。
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱，过夜反应（16小时）。
* 若总反应体积较大，也可持续旋转混合。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA终止反应后，1500 xg离心5分钟，去除上清。
* 溶液比较浓稠，小心不要影响下层的细胞; 建
议留下5ml左右的溶液。
** 没有EDTA, 可使用无钙镁DPBS取代。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，500 xg离心5分钟，去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，250 xg离心5分钟，去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞后，即可按常规细胞培养方法接种P0代细胞培养。
* 消化后的原代细胞，建议培养时接种密度提高
到10,000/cm2以上；传代后即可按常规的接
种密度培养 。
以皮下脂肪组织块为例
1. 以DPBS将新鲜的皮下脂肪组织块漂洗干净，剔除明显的血管或血块。
2. 将组织块剪成3-5mm3，移入50ml离心管，再加入适量的分离液。
* 1克组织块可加入约5ml分离液。
** 视情况而定，可自行在分离液中添加1%青链双抗。
3. 把50ml离心管横放在37度细胞培养箱，反应4小时 (用户也可自行调整反应时间)。
* 若总反应体积较大，也可使用持续旋转混合。
4. 加入和分离液等体积的0.05%EDTA
终止反应后，250 xg离心5分钟，去除上清。
* 没有EDTA, 也可使用无钙镁DPBS取代。
5. 以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细胞后，
250 xg离心5分钟，去除上清。
6. 再次以和分离液等体积的无钙镁DPBS重悬细
胞后，250 xg离心5分钟，去除上清。
7. 用适量的培养基重悬细胞，再以100目的筛网
过滤细胞液后，即可按常规细胞培养方法接种
细胞培养。
* 消化后的原代细胞，建议培养时接种密度提高
到10,000/cm2以上；传代后即可按常规的接
种密度培养。
【产品性能指标】
1. pH值：7.0-8.0
2. 渗透压（MOSM/KG）：310-345
3. 无菌检测：无菌
4. 内毒素（EU/ml）：＜10
5. 原代细胞分离实验：＞80%
【注意事项】
1. 本品仅用于体外诊断，不用于临床治疗，严禁内服，不能用嘴吸液。
2. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。
3. 操作过程应避免污染。
4. 操作人员万一与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗。
5. 禁止使用超出规定有效期的产品。
【备案人/生产企业】
上海达特希尔生物科技有限公司
生产地址/住所：中国（上海）自由贸易试验区祖冲之路 1505弄80号12幢3楼C，D区
邮政编码：201203
电话号码：021-58785545
传真号码：021-58777053
【售后服务单位】
上海达特希尔生物科技有限公司
【产品技术要求编号】
沪浦械备20200167号
【医疗器械备案凭证编号】
沪浦械备20200167号
【生产备案凭证编号】
沪浦食药监械生产备20152128号
【说明书批准及修改日期】
2021年09月17日
