品牌:HIT-Blue (Xl-Blue 感受态细胞)
货号:HIT-Blue
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RBC Bioscience授权ViVaCell生产的HIT Competent Cells,无需热休克直接转化。HIT感受态细胞操作步骤简单,时间短,冻融稳定性好,并具高效转化率。

HIT-Blue--Xl-Blue 感受态细胞

货号: M54010100
规格: HIT-Blue: 100 μL×10
   Control plasmid: 10 μL×1
价格: ¥320.00
储存: -70°C储存至少6个月转化效率不变
说明书: DH5&alpha感受态细胞转化操作说明 HIT感受态细胞操作规程
操作演示: HIT 感受态细胞转化操作视频
FAQ: HIT 感受态细胞FAQ
采用大肠杆菌Xl-Blue菌株经特殊工艺制备得到的感受态细胞,用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-70℃保存6个月转化效率不发生改变。
基因型hsdR17(rk- mk+), recA1, endA1, gyrA96,thi-1,supE44,relA1,
ac[F'proAB acIqZDM15Tn10(Tet )]
HIT-Blue 不需要热刺激和恢复步骤。
Xl-Blue感受态细胞转化效率:1ⅹ108~5ⅹ108 cfu/μg pUC19
Xl-Blue感受态细胞应用:蓝白斑筛选,cDNA库创建, 亚克隆。
Xl-Blue感受态细胞具四环素抗性。
HIT 感受态细胞优势:只需使用冰块!
与传统感受态细胞相比:
  • 无需热刺激
  • 10min以内完成转化步骤
  • 真正1步/1管过程
  • 效率高达 108 cfu/ug 质粒
  • 增加冻融耐性
  • 简单的操作过程适合于自动化
操作步骤:
新一代感受态细胞,无需热刺激!
只需10mins简单操作,高效转化!
HIT competent cell protocol
 

 

(1-10 minutes, efficiency=108 cfu/μg)

注意:转化前请准备好冰浴,将平板培养基与涂布玻璃珠干燥预热到37℃

  1. 1) 从-70℃冰箱取出感受态细胞置于冰浴中10~20秒,至解冻1/3。
  2. 2) 加入待转化的DNA(其中DNA 体积不应超过感受态细胞体积的1/10)。漩涡振荡离心管1秒,混匀内容物。
  3. 3) 控制冰浴中静置1-10分钟(建议可以静置5分钟)。
  4. 4) 转移至37℃干燥平板培养基(含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基等)上, 用ViVaCell涂布玻璃珠涂板。
  5. 5)平板置于 37℃培养16-18 小时,观察转化克隆的增长
对于较大质粒(>6 kb)与cDNA库操作步骤:20min冰浴à1min42˚C水浴à 20min冰浴,将有助于提高转化效率。
参考文献
  1. a Identification and characterization of a novel enzyme related to the synthesis of PUFAs derived from Thraustochytrium aureum ATCC 34304
    DH Kang, P Anbu, YS Jeong, BP Chaulagain… - Biotechnology and …, 2010 - Springer
  2. b Phenotypic and genetic characterization of Erwinia rhapontici isolated from diseased Asian pear fruit trees
    SP Thapa, SY Cho, JH Hur, CK Lim - Phytoparasitica, 2012 - Springer
  3. c Development of SCAR marker for simultaneous identification of Miscanthus sacchariflorus, M. sinensis and M. x giganteus
    JK Kim, GH An, SH Ahn, YH Moon, YL Cha… - Bioprocess and …, 2012 - Springer
  4. d Enhanced 2, 3-Butanediol Production in Recombinant Klebsiella pneumoniae via Overexpression of Synthesis-Related Genes
    KB Rim, JH Park, MK Oh, JW Lee - Journal of Microbiology and …, 2012 - papersearch.net
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