FiberCell系统适用于长期大量收获外泌体,可收获外泌体长达数月。
中空纤维细胞培养系统是干细胞与293细胞等生产外泌体的理想反应器。由于外泌体不能透过纤维,可收获高浓度的外泌体,并且细胞碎片显著降低。外泌体还能长时间持续收获,保持活性不变。
使用培养瓶生产外泌体时,需加入血清,因而存在外源外泌体与蛋白杂质,最终产物需要纯化。而细胞在FiberCell系统中培养时,循环培养基中的外泌体不会进入细胞生长的空间,并且该系统也易适用于无血清环境,或使用血清替代物(CDM-HD,FiberCell)培养,从而得到高纯度与高浓度的外泌体,中型培养筒的单次收获相当于200-250个T175 flask。
中空纤维富集的外泌体,纯化后以NTA分析(A)和透射电镜(B)验证其物理特性。相较于平盘培养,中空纤维可以更有效地富集外泌体(C)。
参考文献
Large-scale preparation of extracellular vesicles enriched with specific micro-RNA: Yoo, KW et al. ; Tissue Engineering. 2018 [abstract]
Scalable, cGMP-compatible purification of extracellular vesicles carrying bioactive human heterodimeric IL-15/lactadherin complexes: Watson,D.C. et al.; J Extracell Vesicles. 2018 Feb 28;7(1) [open acccess]
Use of a Hollow Fiber Bioreactor to Collect Extracellular Vesicles from Cells in Culture: Yan IK et al.; Methods Mol Biol. 2018;1740:35-41 [abstract]
Clinical Scale Production and Wound Healing Activity of Human Adipose Derived Mesenchymal Stem Cell Extracellular Vesicles from a Hollow Fiber Bioreactor. [Fibercell Poster ISEV2017]
Efficient production and enhanced tumor delivery of engineered extracellular vesicles: Watson DC et al.; Biomaterials 105, 2016: 195-205 [open access]